در مرحله اول استریلیزاسیون پمپ خلاء با ایجاد مکش ، هوای داخل محفظه را تخلیه کرده ،
سپس بخار وارد دستگاه میشود. اتوکلاوها معمولا توسط فشار تنظیم میشوند.
به عنوان مثال در بخار خالص (درجه اشباع ۰/۸ تا ۱) با فشار ۲ بار ، دمای بخار باید ۱۳۴ درجه سانتی گراد باشد.
استریل کردن وسایلی که از مواد متخلخل ساخته شدهاند مثل منسوجات و ابزار بسته بندی شده که هوا در آن محبوس میشود ، در مقایسه با سایر وسایل بسیار دشوار است.
در زمان تخلیه ، هوای داخل محفظه و بستهها به بیرون کشیده شده و عموماً هر چه زمان مکش بیشتر باشد، جایگزین شدن بخار مؤثرتر خواهد بود.
متناسب با افزایش فشار منفی داخل محفظه ، خارج سازی هوا دشوارتر میشود ؛ به همین دلیل دستگاههای خودکار امکان کاهش فشار (تخلیه) و وارد ساختن بخار را در چند مرحله فراهم میسازند.
در این روش بخار به طور متناوب جایگزین هوا شده و راندمان بالاتری نسبت به تخلیه تنها دارد.

گستره ی کاربرد اتوکلاو
تست دستگاه اتوکلاو تضمین کننده استرلیزه شدن کامل تجهیزات و موارد است و باید به صورت دورهای اتوکلاوها بازرسی و تست اتوکلاو صورت پذیرد.
از قابلیت اتوکلا به طور کلی برای تمام مواد غیر عفونی و عفونی آلوده شده با عوامل بیولوژیک شامل بقایای نمونههای محیط کشت تلقیح شده ، پاتوژنهای رشد کرده ، سلولهای انسانی ، حیوانی و گیاهی ، مواد آلوده شده به مدفوع انسان یا حیوان ، محصولات خونی انسان و حیوان و … قابل انجام میباشد.
موادی مثل داروهای سرطانزا ، رادیو ایزوتوپها ، مواد شیمیایی سمی ،
مواد شیمیایی قابل تبخیر یا هر ماده خطرناک دیگری را که ممکن است در اثر حرارت تبخیر شود و انتشار یابد نمیتوان اتوکلاو کرد.
به طور کلی مواد قابل اشتعال ، واکنش پذیر خورنده ، سمی یا مواد رادیو اکتیو نباید اتوکلاو شوند.
اکثر اتوکلاوهای موجود در بازار مجهز به اجرای چرخه های تکراری و پشت سر هم نیستند ،
بدون اینکه کاربر برای شروع هر چرخه حضور داشته باشد.
برای اجرای چرخه جاذبه ، خلاac یا مایعات استاندارد ، اپراتور با انتخاب نوع چرخه ،
وارد کردن زمان و دمای مناسب عقیم سازی و فشار دادن دکمه شروع ، فرایند را آغاز می کند.
در پایان چرخه ، اپراتور باید درب ضدعفونی کننده را باز کرده و بار را قبل از شروع چرخه دیگر بردارد. آزمایش چرخه حیات محصول به روش فوق بسیار زمانبر است ، زیرا برای کنترل اتوکلاو و راه اندازی مجدد هر چرخه زمان ارزشمندی صرف می شود.

گستره ی کاربرد اتوکلاو
اتوکلاوها برای اطمینان از عملکرد مناسب به آزمایش دوره ای نیاز دارند.
مقررات بهداشت عمومی اورگن ایجاب می کند که اتوکلاوهایی که برای آلوده سازی مواد زائد تنظیم شده مانند کشت ها و ذخایر مورد استفاده قرار میگیرند ماهانه با آزمایش چالش با استفاده از شاخص های بیولوژیکی حاوی اندوسپورهای باکتری Geobacillus stearothermophilis آزمایش شوند .
OSU Biosafety کیت های تست اتوکلاو را به محققان یا سایر کاربران در دانشگاه ارائه می دهد. این کیت ها حاوی یک ویال اندوسپور ، کارت اطلاعات و بسته بندی برگشتی هستند. از کاربران خواسته می شود ویال را درون کیسه ای از زباله ها دفن کرده و در اتوکلاو قرار دهند ، سپس ویال را بازیابی کرده و برای ارزیابی به EH&S برگردانند. گزارشی از نتایج تولید شده و برای سوابق کاربر به کاربر ارسال می شود.
منبع: تست اتوکلاو سایت کارن
